O teste de citotoxicidade de formação de colônias, também conhecido como ensaio clonogênico, visa avaliar a capacidade do Item de Teste em interferir na viabilidade celular in vitro, sendo fundamental para determinar a morte reprodutiva celular após o tratamento com agentes citotóxicos.
Para este fim, antes e após o tratamento com o Item de Teste, as células são cultivadas em diluições apropriadas para formar colônias ao longo de 1 a 3 semanas. As colônias são fixadas com glutaraldeído, coradas com cristal violeta e contadas utilizando um microscópio ou a olho nu, dependendo do sistema teste utilizado.

Este teste está entre os ensaios descritos na norma ISO 10993-5, Anexo B, que visa avaliar a citotoxicidade de dispositivos médicos.

No BCRJ, o teste de citotoxicidade de formação de colônias é realizado conforme descrito por Franken et al., 2006 (doi:10.1038/nprot.2006.339), utilizando células de mamíferos para análise da citotoxicidade in vitro de Itens de Teste.