O ensaio consiste em expor uma amostra líquida a culturas de cepas selecionadas de Salmonella enterica sorovar Typhimurium*, que possuem mutações interferentes nos processos bioquímicos de síntese de histidina. O teste é conduzido na presença e ausência de um homogenato de fígado de rato e cofatores que fornecem metabolismo exógeno parcial da amostra, conhecido como mistura S9 ou S9 mix. A mistura (amostra + cepa ± S9 mix) é inoculada em placas de Petri contendo meio seletivo. Após 48 a 72 horas, o número de colônias revertentes é contado e os resultados são comparados ao controle negativo (solvente).
No BCRJ, a contagem bacteriana é realizada de maneira automatizada com o contador de colônias SCAN 300, assegurando rigorosa qualidade e reprodutibilidade nos resultados obtidos. Além disso, é emitido um relatório contendo imagens de todas as placas analisadas para cada cepa e condição do item testado.